人主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類熒光定量檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū) 1、試劑盒簡(jiǎn)介貨為了適應(yīng)人主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類熒光定量檢測(cè)試劑盒快速檢測(cè)和疫病研究的需要，本公司參照 OIE 國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定的引物序列，經(jīng)多次實(shí)驗(yàn)及系統(tǒng)優(yōu)化，開(kāi)發(fā)了本試劑盒。應(yīng)用本試劑盒進(jìn)行檢測(cè)具有快速、靈敏、特異、準(zhǔn)確、安全操作簡(jiǎn)單、應(yīng)用廣泛和高通量檢測(cè)等特點(diǎn)及優(yōu)點(diǎn)。2、試劑盒組成:
試劑盒組成包括核酸提取試劑和核酸擴(kuò)增試劑，具體組成參見(jiàn)表 1：s 表 1：試劑盒組成（50test/盒） 組成成分 | 體積 | 樣品 DNA 提 取 液 1 樣品 DNA 提 取 液 2 | 5ml×1 管 500µl×1 管 | 核酸擴(kuò)增試劑： DEPC 水 BP PCR 反應(yīng)液 Taq 酶(5U/ul) 陰性對(duì)照 BP 陽(yáng)性對(duì)照 | 5ml×1 管 750µl×1 管 40µl×1 管 1ml×1 管 1ml×1 管 |
人主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類熒光定量檢測(cè)試劑盒操作流程: 1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。 2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL； 3.樣本孔中加入待測(cè)樣本50μL；空白孔不加。 4.除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。 5.棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）。 6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。 7.每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。 樣本：血清 血漿 組織勻漿等液體樣本
標(biāo)記物：血清 血漿 組織勻漿等
應(yīng)用：僅用科研實(shí)驗(yàn)檢測(cè)定量，定性檢
檢測(cè)方法：夾心法
技術(shù)要求：全程按說(shuō)明書(shū)步驟檢測(cè)，操作規(guī)范，專業(yè)，儀器設(shè)備齊全。 規(guī)格：48t/96t 性狀：液體 運(yùn)輸方式：快遞發(fā)貨 有效期：6個(gè)月品 特點(diǎn)：靈敏性高，---性，吸附均勻，吸附性好，回收利用率高，是一款可以讓您放心選購(gòu)的產(chǎn)品。 使用范圍：此產(chǎn)品供科研實(shí)驗(yàn)使用，不得用于---。 用途：用于測(cè)定人血清、血漿、組織及相關(guān)液體樣本中的含量或活性。 人主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類熒光定量檢測(cè)試劑盒注意事項(xiàng): 1． 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。 2.各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間最好控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。 3.請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，最好做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔di一孔的OD值），請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測(cè)定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)最后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。 4.封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。 5.底物請(qǐng)避光保存。 6.嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn). 7.所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。 8.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。 9.不能使用過(guò)期產(chǎn)品。
10. 如與英文說(shuō)明書(shū)有異，以英文說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)。 每個(gè)樣品測(cè)試反應(yīng)體系配制見(jiàn)下表 2。 表 2 每個(gè)樣品測(cè)試反應(yīng)體系配制表 試劑 | PCR 反應(yīng)液 | Taq 酶 | 合計(jì) | 用量 | 14.5 μL | 0.5μL | 15μL |
人主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類熒光定量檢測(cè)試劑盒試劑盒組成及試劑配制：
1. 酶聯(lián)板（Assay plate ）：一塊（96孔）。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品（Standard）：2瓶（凍干品）。
3. 樣品稀釋液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶
4. 生物素標(biāo)記抗體稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5. 辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6. 生物素標(biāo)記抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7. 辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8. 底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。
9. 濃洗滌液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10. 終止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。 | 
