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ELISA檢測結(jié)果解讀
點擊次數(shù):1596 更新時間:2023-04-23

   ELISA檢測結(jié)果可以定量、定性或半定量地解釋。在定量檢測中,使用已知標(biāo)準(zhǔn)的連續(xù)稀釋液來生成標(biāo)準(zhǔn)曲線,通常是光密度(OD)與濃度的關(guān)系。由此,可以計算出未知樣品中目標(biāo)物的精確數(shù)量。

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                       標(biāo)準(zhǔn)曲線計算和ELISA實驗中未知物目標(biāo)濃度測定示例

  在定性檢測中,通常仍會通過使用酶標(biāo)儀來收集數(shù)據(jù),但結(jié)果將通過與沒有標(biāo)準(zhǔn)曲線的空白和/或陰性孔的比較來解釋為陽性或陰性。

  半定量檢測也是在不使用連續(xù)稀釋或標(biāo)準(zhǔn)曲線的情況下收集數(shù)據(jù)。然而,包含陰性和陽性標(biāo)準(zhǔn),通常是高陽性和低陽性,有利于相對比較未知樣本井和已知狀態(tài)的樣本孔之間的水平。

通過使用這些標(biāo)準(zhǔn)來監(jiān)測檢測的可重復(fù)性,可以設(shè)定一個臨界值,超過臨界值的結(jié)果確定為陽性,低于臨界值的為陰性。一些檢測方法可能還包括一個“灰區(qū)"。對于數(shù)值落在這個區(qū)域的樣品,建議重新測試或進一步調(diào)查。

  雖然定量檢測在某些情況下可能是可取的,但在每塊板上包含一條完整的標(biāo)準(zhǔn)曲線會占用寶貴的孔位。因此,根據(jù)用戶希望從檢測結(jié)果中獲得的信息,存在一種權(quán)衡。

  像許多檢測方法一樣,從ELISA獲得的結(jié)果很少可能是100%準(zhǔn)確的,假陽性和假陰性結(jié)果都有可能。因此,大多數(shù)測試將與靈敏度和特異性相關(guān);它們越接近100%,測試就越好。

有許多因素會影響這些值,例如:

1、非特異性結(jié)合或交叉反應(yīng)的高背景;

2、抗體對其目標(biāo)親和力差;

3、非最佳檢測條件;

4、樣本條件和復(fù)雜性。

因此,計算靈敏度和特異性的數(shù)值是許多ELISA檢測方法發(fā)展的一個重要步驟,特別是在診斷環(huán)境中,以確定獲得的任何結(jié)果的信息量和可靠性。


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