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探針法PCR試劑盒步驟構成:
1、模板DNA的變性:模板DNA經加熱至93℃左右一定時間后,使模板DNA雙鏈或經PCR擴增形成的雙鏈DNA解離,使之成為單鏈,以便它與引物結合,為下輪反應作準備。
2、模板DNA與引物的退火(復性):模板DNA經加熱變性成單鏈后,溫度降至55℃左右,引物與模板DNA單鏈的互補序列配對結合。
3、引物的延伸:DNA模板--引物結合物在72℃、DNA聚合酶(如TaqDNA聚合酶)的作用下,以dNTP為反應原料,靶序列為模板,按堿基互補配對與半保留復制原理,合成一條新的與模板DNA鏈互補的半保留復制鏈。
探針法PCR試劑盒特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供樣品rna模板。
2. 引物和探針經過優(yōu)化,靈敏性高。
3. 提供陽性對照,便于區(qū)分假陰性樣品。
4. 特---高,引物是根據傘枝梨頭霉高度保守區(qū)設計,不會跟其他---的rna發(fā)生交叉反應。
5. 本產品足夠 50 次 20μl 體系的探針法熒光定量 rt-pcr 反應。
6. 本產品只能用于科研。